水产品中孔雀石绿残留快速检测技术的现状与突破-mile米乐m6

      2016年底,国内媒体“热搜”的北京超市“活鱼下架事件”,社会普遍认为与孔雀石绿等的滥用有关；2019年4月，省农业农村厅委托山东省水产品质量检验中心对临朐县水产品进行了质量安全抽检，被抽检的6个鲟鱼样品检验呈阳性，检验结果结果为孔雀石绿含量超标；同年6月，杭州市消保委对本志7家买菜类app进行消费评测，结果为杭州美团、叮咚买菜的鳜鱼、天津永辉超市草鱼被检出孔雀石绿超标。由此可见，孔雀石绿残留问题已成为一个日益突出的食品安全问题。

 

      检测技术的应用

      国内外均以孔雀石绿和其代谢物无色孔雀石绿的总量为测定指标，目前测定方法主要有仪器分析测定(高效液相、液相色谱质谱联用等)、免疫学检测技术(酶联免疫检测技术、胶体金检测技术等)和微光探测与免疫学技术的结合（荧光定量检测技术）。从快速筛查市场而言，后两种方法已逐渐成为检测市场的主流。

      1. 仪器分析法

      主要是指利用气相色谱法、气相色谱-串联质谱法、液相色谱法、高效液相色谱-串联质谱法或各类光谱仪等大型精密仪器对行药物残留进行检测，许多国家和地区已将高效液相色谱-串联质谱法作为检测孔雀石绿残留的确证方法。但此方法需要昂贵的仪器和专业的技术人员操作，且无法实现大批量快速筛查，成本相对较高，不具备现场快速筛查的优势。

      2. 免疫学检测技术

免疫学检测技术是利用抗原抗体的特异性结合的原理，相对仪器分析法而言，具有的最大优势为操作便捷。

      2.1 酶联免疫检测技术

      其原理是应用抗原和抗体的特异结合与酶催化作用的有机结合，具有较高的灵敏度，和可定量检测的特性。虽然酶免较仪器法具有一定的优势，但由于其检测时需专业人员操作，检测时间较长，同样也无法满足现场快速筛查的需求。

      2.2 胶体金检测技术

      胶体金检测技术是以纳米金颗粒作为示踪标识物，应用抗原和抗体具有特异性结合的原理所建立的新型免疫标记技术。其优点就是操作简单、检测时间短和无需专业技术人员操作。因为这些特性，使得胶体金技术广泛应用于大分子类蛋白、农药残留、兽药残留、小分子类药物和毒素类等的快速检测中。虽然胶体金法具有一定的优势，但由于其较差的灵敏度，无法满足国家检测标准的要求，加大了漏检的风险。

      3. 微光探测与免疫学技术的结合

      荧光定量检测技术是食品安全快速检测市场中最具代表性的新型检测方法，此方法是免疫学技术、色谱层析技术、生物探针技术和微光探测技术的有机结合，兼具仪器分析法、酶联免疫检测技术、胶体金检测技术的优点，取长补短，在保持仪器法高精确性的同时还保留了胶体金法检测的快速、简便和酶免技术的高灵敏度、可定量的特点。

      孔雀石绿检测技术的发展

      在快速检测产品中，孔雀石绿酶免试剂盒最早进入快筛市场，但由于其繁琐的操作过程，很快被胶体金产品所取代。孔雀石绿胶体金产品虽然检测速度快，只需30-45分钟，但胶体金较差的灵敏度，也增加了漏检的风险；同时，组织类的样本前处理依然复杂、费时，存在着离心、吹干等步骤，不仅增加了人力成本，也使得在吹干大量溶剂时，严重污染了环境。对于吹干的问题，市场一直在寻求解决的方法，近年来市场上推出的spe产品就是对吹干这一步骤的优化处理。spe方法的优点是省略了吹干环节，使得处理速度有了一定的提升，但同样存在着一些不足：1、步骤和仪器未得到省略，离心及相应的仪器仍需使用，吹干步骤换成了过spe柱，同时也增加了固相萃取仪；2、增加了成本，spe柱成本较高，约增加20-40%；3、浪费溶剂，吸附和洗脱时均需大量试剂；4、洗脱效率不稳定等。

针对目前快速检测方法仍然存在的问题，我司经过了长时间的技术攻关，结合高分子纳米材料和免疫层析卡的优点，开发了全新的孔雀石绿残留快速检测卡，并结合先进的专利数据采集技术，国内外首创地研制出了全新的孔雀石绿fst快速前处理方案（包含胶体金和荧光层析系列产品），较传统的检测产品相比，检测效率提高两倍以上，灵敏度更优，精密性更好，智能化更高。产品如下图：

 

      fst快速前处理方案

      fst的技术理念是我司专门为解决繁琐的组织类样本前处理而开发的，为国内外首创。其特点是省略了离心、吹干或上萃取柱步骤，实验全程只需一把移液器即可完成，极大缩短了样本检测时间。

目前，我司的fst系列产品包括两大类：fst－胶体金和fst－荧光层析。孔雀石绿fst－胶体金产品在保持同类市场的高灵敏度的前提了，把组织类的样本处理进行了极简化处理，处理时间从常规的25-40分钟缩短为 10分钟以内，整个检测过程无需任何辅助仪器，极大的节省了人力和物力成本，且此类产品顺利通过了2018年的农业部验证和2019年的广东省快检验证。

      孔雀石绿fst－胶体金产品虽然在性能上有了很大提升，但其不能定量的不足也始终无法解决，针对这一难点，我司专门开发fst－荧光层析系列产品。孔雀石绿fst－荧光层析产品结合了高分子纳米技术和微光探测技术，是在fst－胶体金产品性能上的进一步提升，具有灵敏度高（可达液相质谱的灵敏度要求）、样本处理快速（缩短为5分钟以内）、抗干扰能力更强（大稀释比例降低了样本对产品的干扰）、半定量的检测（检测结果以数据显示）、数据即时处理（数据即时存储或打印）等优势。孔雀石绿fst－荧光层析产品顺利通过了2018年农业部验证，为全场时间最快，检测灵敏度最高的快速检测产品。为了更好的区分现有市场中主流检测产品间的差异，下表针对参加2018年农业部验证的相关技术产品做了简单的技术比较：

      结论与展望

      水产品是国民餐桌上的重要组成，随着政府对水产品食用安全的进一步加强，快筛市场对现有检测技术也必将提出更高的要求。快速、便捷、准确、智能化等一直是快速检测的重要需求，而我司的fst前处理技术恰巧是对这一需求的极大补充。随着fst技术的进一步发展，相信对监管孔雀石绿的滥用具有重要意义。